Online edition：ISSN 2758-089X
大脳皮質神経細胞におけるNicotine長期曝露に伴うL型電位依存性Ca2+チャンネルの機能変化について
神経細胞への低濃度nicotine長期曝露(0.1μM, 72時間）による電位依存性Ca2+ チャンネル（ＶＤＣＣ）および中枢性nicotinic acetylcholine （ｎｎＡＣｈ）受容体の機能変化について初代培養マウス大脳皮質神経細胞（神経細胞）を用いて検討した． ３０ mM KCI 刺激に伴う神経細胞内への［45 Ca 2+］流入は，神経細胞へのnicotineの曝露時間および濃度依存性に増加した．また，この［45 Ca 2+］流入量はnicotine曝露開始24時間後に最大増加を示し，その後72時間まで継続した． 0.1μ.Ｍ nicotine の72時間曝露による神経細胞内への［45 Ca 2+］流入増加は, nnACh受容体阻害薬であるmecamylamineの共存下において完全に抑制された．同様に，Ｌ型ＶＤＣＣ阻害薬であるnifedipineの共存下でも抑制されたが，Ｎ型およびＰ/Ｑ型ＶＤＣＣ阻害薬では抑制されなかった．このnicotine処理により［3H］verapamil結合は増加し，しかもこめ結合増加はBmax値（［3H］verapamil結合部位数）の増加に起因するものであり，一方，Kd値（［3H］verapamilに対する親和性）には変化がなかった. Western blotおよびNothern blot法ではＬ型VDCC α C， αD, αFおよびα2/б1 subunitの発現が増加したが，それぞれＰ/Ｑ型およびＮ型ＶＤＣＣ，α1Ａおよびα1B subunit については変化が認められなかった．またＬ型ＶＤＣＣβ4 mRNAの発現変化も認められなかった． 神経細胞へのnicotine曝露により［3H］nicotine結合の増加が生じ，この増加は［3H］nicotine結合のBmax値のみの増加によるものであり，Kd値には変化が認められなかった．さらにWestern blot法による検討からこのnnACh受容体subunitであるα4およびβ2 subunit の増加が観察された． nnACh受容体の変化については, Western blot法において，a4およびβ2 subunitの発現が増加したが, α3 subunit については変化が認められなかった． 以上の結果から，神経細胞への低濃度nicotine長期曝露によりnnACh受容体のup-regulationとともにＬ型ＶＤＣＣのup-regulationが生じ，これにより神経細胞内への［45 Ca 2+］流入増加が起こると考えられる． （平成14年２月26日受理）
- 著者名
- 毛利 豊
- 巻
- 28
- 号
- 1
- 頁
- 43-58
- DOI
- 10.11482/KMJ28(1)043-058.2002.pdf
