Online edition：ISSN 2758-089X
ニワトリ胚の四肢形成における Wnt-Frizzled相互作用
LRP-5とLRP-6とともに10種類のFrizzled（Fz）がWntのレセプターとして知られているが，リガンドとレセプターの関係はWntタンパク質が直接的な結合実験が困難なため，あまりわかっていない．ニワトリ肢芽で特定のパターンをもって発現するニワトリWnt-3a，Wnt-4，Wnt-5a，Wnt-6，Wnt-7a，Wnt-10a，Wnt-11のWntメンバーにC末端にHAのタグをつけ，ニワトリFz-4，Fz-10にはレセプターの細胞内にFLAGのタグをつけDF-1細胞で発現させた．DF-1細胞に単独もしくは共存下で導入したWnt-HAとFz-FLAGのコンストラクトを発現させ，直接結合するWnt-HAを調べるために，anti-FLAG抗体でレセプターの免疫沈降を行う前後でウエスタンブロッテッイングを行った．Wnt-HAが発現しているDF-1細胞の上清をFz-FLAGを発現させた細胞に加えた時，Fz-10に対してWnt-3a，Wnt-5a，Wnt-7aが，Fz-4に対してはWnt-5aが検出された．Fz-10ではWnt-6とWnt-10aに弱い結合がみられた．少量のWnt-7aはWnt-5aとの比較においてFz-10との結合効率はよく，Wnt-7aに対して高い親和性がみられた．Wnt-7aは時間的，空間的に肢芽においてFz-4ではなくFz-10と共に発現している．これらの結果は，四肢の形態形成におけるWntとFzの発現と機能的な関係を現している．
（平成18年４月12日受理）
- 著者名
- 笹岡 俊輔
- 巻
- 32
- 号
- 3
- 頁
- 127-137
- DOI
- 10.11482/2006/KMJ32(3)127-137,2006.pdf
