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Online edition：ISSN　2758-089X

β６位にアミノ酸置換をもった異常血色素(Hb S， Ｈｂ Ｃ， Ｈｂ Machida)のＰＣＲ法(Polymerase Chain Reaction)による遺伝子解析

異常血色素(HbS[β6 (A3) Glu→Ｖａｌ],ＨｂＣ[β6 (A3) Glu→Ｌｙｓ]やHb Machida[β6 (A3) Glu→Ｇｌｎ])保因者の末梢血液中白血球層から調製されたＤＮＡを１対のamplification primer と熱安定性Ｔａｑポリメラーゼによって増幅した．増幅ＤＮＡは２種の制限酵素(Sph Ⅰ とHindⅢ)で消化し，アガロースゲル電気泳動-DEAEセルロース抽出法によって精製後，同種制限酵素で処理されているM 13mp 19ベクターに組み込まれた．DNA sequencingはdideoxy法で行い，β６位コドンの塩基置換について調べた. Hb Ｓ，ＨｂＣやHb Machida の異常β遺伝子のβ６位コドンは，正常βＡ遺伝子でＧＡＧであるのに対し，βs遺伝子ではGTG，βｃ遺伝子ではAAG,そしてβMachida遺伝子ではCAGであった．これらβ６コドンの変異はそれぞれの異常血色素の置換アミノ酸に相当するものであった．この方法は異常血色素，特に(超)不安定異常血色素の一次構造解析の有益な方法となると考えられる．　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　(平成２年３月12日採用)
著者名
原野　昭雄，他
巻
16
号
1
頁
101-106
DOI
10.11482/KMJ-J16(1)101

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